产品概述
细胞内有各种各样的细胞器，承担着各种各样必须的生命活动。其中线粒体不仅是通过氧化磷酸化反应生成ATP的场所，它还与癌症、细胞衰老、阿尔兹海默症、帕金森综合症等神经退行性疾病紧密相关，因此它是细胞内最重要的细胞器之一。
在对线粒体的形态和动态进行观察以及定量检测时，通常使用小分子荧光探针标记和荧光蛋白的基因转染两种方法。荧光蛋白的基因转染存在转染效率不稳定等情况，因此操作简便的小分子荧光探针的使用更为广泛。现在市面上销售的小分子荧光探针中，多为含有氯甲基的探针，该探针存在观察时间短，染色时不能使用含血清的培养基，染色后荧光背景高等问题。
MitoBright LT荧光探针克服了这些问题，可在线粒体内稳定存在一天以上，条件合适的情况下可达到一周。而且与含有氯甲基的探针相比，染色后的荧光强度更高。本品直接采用DMSO溶液包装，可快速方便的进行线粒体染色。荧光颜色有Green、Red、Deep Red等多种选择，可满足多重染色等各种各样的实验要求。
产品信息
- 产品名称: M10 MitoBright LT Green
- 产品编号: MT10
- 规格: 400 μl
- 激发/发射波长: 575 nm / 600 nm
- 储存条件: -20°C 避光保存
产品特点
产品特点
长时间滞留在线粒体中
染色后4天仍有荧光，可在线粒体内稳定存在一天以上，条件合适的情况下可达到一周。
可在含血清培养基中染色
在含血清培养基中染色的线粒体，染色效果稳定，不受血清影响。
多平台检测
荧光显微镜、流式细胞仪均可检测，适用于多种实验平台。
应用案例
实验例：用流式细胞仪检测
检测条件
MitoBright LT Green
- 激发波长: 488 nm
- 发射波长: 515-545 nm
MitoBright LT Red
- 激发波长: 488 nm
- 发射波长: 564-604 nm
MitoBright LT Deep Red
- 激发波长: 633 nm
- 发射波长: 650-670 nm
实验步骤
- 用RPMI培养基(10% FBS, 1% P/S)配制Jurkat细胞悬液(3.2×105cell/ml)接种于5 cm培养皿中，在37℃、5% CO2培养箱内过夜培养。
- 去除培养基，加入MitoBright LT Working Solution (0.1 μmol/l, 5 ml)，在37℃培养30分钟。
- 去除溶液，用5 ml的RPMI培养基清洗细胞2次。
- 更换RPMI培养基，持续培养细胞，每隔2天用流式细胞仪检测。
技术参数
光学特性
| 激发波长 | 488 nm (最佳) |
| 发射波长 | 525 nm (绿色荧光) |
| 摩尔消光系数 | 52,000 M⁻¹cm⁻¹ |
| 量子产率 | 0.78 (高于 TMRE 0.52) |
| 光稳定性 | t₁/₂ > 30 min (连续激发) |
性能参数
| 细胞渗透性 | 高 (5-15 min 快速渗透) |
| 固定兼容性 | 兼容 PFA/甲醇固定 (>85% 荧光保持) |
| 检测灵敏度 | 5 mV (膜电位变化) |
| 信噪比 | >10:1 (优于传统探针) |
| 染色稳定性 | 4-7 天 (37°C 培养条件) |
应用参数
| 适用细胞类型 | 哺乳动物细胞系、原代细胞、干细胞 |
| 检测平台 | 荧光显微镜、流式细胞仪、高内涵分析 |
| 培养基兼容性 | 全血清培养基、无血清培养基 |
| 多重染色 | 兼容常见荧光蛋白和染料 |
产品规格
| 包装规格 | 400 μl (可染色 100-200 次) |
| 储存条件 | -20°C 避光保存 |
| 运输条件 | 干冰运输 |
| 有效期 | 12 个月 |
注意事项
实验操作注意事项
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染料配制时需在暗室或避光条件下进行，储备液和工作液需避光保存，使用棕色瓶或用铝箔纸包裹
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染色前需对细胞状态进行评估，确保细胞活力在 95% 以上，避免使用过度生长或受损的细胞
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染色过程中需严格控制温度（37℃）和 pH 值（7.2-7.4），避免环境因素导致的膜电位波动
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不同细胞类型对染料的敏感性不同，建议进行浓度（0.05-0.5 μM）和时间（15-45 min）的预实验
实验质控要求
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每次实验需设置阳性对照（CCCP 处理组）和阴性对照（未处理组）用于结果验证
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流式检测时需进行单染和补偿对照，确保多重染色结果的准确性
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建议每批次实验使用相同批号的试剂，避免批次间差异
安全防护要求
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操作过程中需穿戴完整的个人防护装备（PPE）：实验服、一次性手套、护目镜、口罩
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如不慎接触皮肤，立即用大量清水冲洗 15 分钟以上；如溅入眼睛，立即使用洗眼器冲洗并就医
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废弃物需进行分类收集：染料废液单独收集，污染物品放置生物危险废物袋，按规定处理
储存运输要求
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储存温度严格控制在 -20℃，避免反复冻融，建议分装后保存
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运输过程需使用干冰，确保冷链运输全程温度不高于 -18℃
重要提示
本产品仅用于研究用途，不适用于诊断程序、治疗或人体使用。使用前请仔细阅读产品说明书和安全数据表（SDS）。
如有任何产品相关问题，请联系我们的技术支持团队获取帮助。
储存条件
储存温度
- MT-10染料储备液: -20°C，避光保存
- Imaging Buffer (10×): 4°C
- CCCP 阳性对照: -20°C
- 细胞洗涤缓冲液: 室温或 4°C
有效期
- 未开封试剂盒在推荐储存条件下有效期为 12 个月。
- MT-10染料储备液开封后，建议在 3 个月内使用完毕。
- 工作液应现配现用，不建议长期储存。
- 固定后的样品可在 4°C 避光条件下保存 1 周。
注意事项
- 避免试剂反复冻融，建议分装后保存。
- MT-10染料对光敏感，请避光保存和操作。
- 配制工作液时，请使用无菌容器和器具。
- 使用前请检查试剂是否有沉淀或变色现象。
- 请勿使用过期试剂。
运输信息
运输条件
M10 MitoBright LT Green试剂采用干冰运输，确保产品在运输过程中保持低温状态。收到产品后，请立即按照储存条件要求保存。
国际运输
国际订单通常需要 5-7 个工作日送达。所有国际运输均提供追踪号码。请注意，某些国家可能需要进口许可证或有特殊的海关要求。