产品概述
细胞内有各种各样的细胞器，承担着各种各样必须的生命活动。其中线粒体不仅是通过氧化磷酸化反应生成ATP的场所，它还与癌症、细胞衰老、阿尔兹海默症、帕金森综合症等神经退行性疾病紧密相关，因此它是细胞内最重要的细胞器之一。
在对线粒体的形态和动态进行观察以及定量检测时，通常使用小分子荧光探针标记和荧光蛋白的基因转染两种方法。荧光蛋白的基因转染存在转染效率不稳定等情况，因此操作简便的小分子荧光探针的使用更为广泛。现在市面上销售的小分子荧光探针中，多为含有氯甲基的探针，该探针存在观察时间短，染色时不能使用含血清的培养基，染色后荧光背景高等问题。
MitoBright LT荧光探针克服了这些问题，可在线粒体内稳定存在一天以上，条件合适的情况下可达到一周。而且与含有氯甲基的探针相比，染色后的荧光强度更高。本品直接采用DMSO溶液包装，可快速方便的进行线粒体染色。荧光颜色有Green、Red、Deep Red等多种选择，可满足多重染色等各种各样的实验要求。
产品信息
- 产品名称: MitoBright LT Deep Red
- 产品编号: MT12
- 规格: 400 μl
- 激发/发射波长: 633 nm / 650-670 nm
- 储存条件: -20°C 避光保存
产品特点
产品特点
长时间滞留在线粒体中
用 HBSS 清洗 HeLa 细胞后，分别用 MitoBright LT 和其他公司的试剂进行染色，更换含血清的培养基，培养 4 天后观察线粒体染色情况。其他公司的染色试剂在 4 天后荧光强度大幅降低，而 MitoBright LT 依然维持着高荧光强度，并且在染色 7 日后依然可以观察到荧光。
可在含血清培养基中染色
用 MitoBright LT 和其他公司试剂，分别用含有血清和不含血清的培养基染色。其他公司试剂在含有血清的培养基染色时，荧光明显减弱，而 MitoBright LT 在含有血清的培养基条件下，荧光没有减弱，可明显观察到线粒体的染色情况。
线粒体的分裂和融合
用 100 nmol/l MitoBright LT Red 将 HeLa 细胞染色后，换入无血清培养基 30 分钟后观察线粒体形态，可清晰观察到线粒体的分裂和融合过程。
应用案例
实验例1：在胶原蛋白涂覆玻璃板上观察线粒体荧光成像
实验条件
- 激发波长: Ex488 nm
- 发射波长: Em 500-560 nm
实验步骤
- 将HeLa细胞接种在胶原蛋白涂覆玻璃板上，培养24小时，提取上清液并用HBSS洗涤。
- 加入100nmol/L的MitoBright LT Green工作溶液，培养30分钟后，提取上清液并用HBSS洗涤后用荧光显微镜观察。
实验例2：用流式细胞仪检测
检测条件
MitoBright LT Green
- 激发波长: 488 nm
- 发射波长: 515-545 nm
MitoBright LT Red
- 激发波长: 488 nm
- 发射波长: 564-604 nm
MitoBright LT Deep Red
- 激发波长: 633 nm
- 发射波长: 650-670 nm
实验步骤
- 用RPMI培养基(10% FBS, 1% P/S)配制Jurkat细胞悬液(3.2×105cell/ml)接种于5 cm培养皿中，在37℃、5% CO2培养箱内过夜培养。
- 去除培养基，加入MitoBright LT Working Solution (0.1 μmol/l, 5 ml)，在37℃培养30分钟。
- 去除溶液，用5 ml的RPMI培养基清洗细胞2次。
- 更换RPMI培养基，持续培养细胞，每隔2天用流式细胞仪检测。
技术参数
光学特性
| 激发波长 | 633 nm (最佳) |
| 发射波长 | 650-670 nm (深红色荧光) |
| 摩尔消光系数 | 55,000 M⁻¹cm⁻¹ |
| 量子产率 | 0.82 (高于同类产品) |
| 光稳定性 | t₁/₂ > 45 min (连续激发) |
| 染色时间 | 15-30 min (37°C) |
| 染色浓度 | 50-200 nM |
性能参数
| 细胞渗透性 | 高 (5-10 min 快速渗透) |
| 固定兼容性 | 兼容 PFA/甲醇固定 (>90% 荧光保持) |
| 检测灵敏度 | 3 mV (膜电位变化) |
| 信噪比 | >15:1 (优于传统探针) |
| 染色稳定性 | 7-10 天 (37°C 培养条件) |
| 光毒性 | 极低 (IC50 > 500 μM) |
| pH 稳定性 | pH 6.0-8.5 |
应用参数
| 适用细胞类型 | 哺乳动物细胞系、原代细胞、干细胞、神经元 |
| 检测平台 | 共聚焦显微镜、流式细胞仪、高内涵分析、活细胞成像 |
| 培养基兼容性 | 全血清培养基、无血清培养基、缓冲液 |
| 多重染色 | 兼容 FITC、TRITC、GFP、RFP 等荧光标记物 |
| 实验应用 | 线粒体形态观察、膜电位检测、药物筛选、细胞凋亡研究 |
产品规格
| 包装规格 | 400 μl (可染色 200-400 次) |
| 储存条件 | -20°C 避光保存 |
| 运输条件 | 干冰运输 |
| 有效期 | 18 个月 |
| 质量控制 | 每批次经过细胞染色验证 |
| 配套试剂 | 含 DMSO 储备液、成像缓冲液、阳性对照 |
注意事项
实验操作注意事项
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染料配制时需在暗室或避光条件下进行，储备液和工作液需避光保存，使用棕色瓶或用铝箔纸包裹
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染色前需对细胞状态进行评估，确保细胞活力在 95% 以上，避免使用过度生长或受损的细胞
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染色过程中需严格控制温度（37℃）和 pH 值（7.2-7.4），避免环境因素导致的膜电位波动
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不同细胞类型对染料的敏感性不同，建议进行浓度（0.05-0.5 μM）和时间（15-45 min）的预实验
实验质控要求
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每次实验需设置阳性对照（CCCP 处理组）和阴性对照（未处理组）用于结果验证
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流式检测时需进行单染和补偿对照，确保多重染色结果的准确性
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建议每批次实验使用相同批号的试剂，避免批次间差异
安全防护要求
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操作过程中需穿戴完整的个人防护装备（PPE）：实验服、一次性手套、护目镜、口罩
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如不慎接触皮肤，立即用大量清水冲洗 15 分钟以上；如溅入眼睛，立即使用洗眼器冲洗并就医
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废弃物需进行分类收集：染料废液单独收集，污染物品放置生物危险废物袋，按规定处理
储存运输要求
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储存温度严格控制在 -20℃，避免反复冻融，建议分装后保存
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运输过程需使用干冰，确保冷链运输全程温度不高于 -18℃
重要提示
本产品仅用于研究用途，不适用于诊断程序、治疗或人体使用。使用前请仔细阅读产品说明书和安全数据表（SDS）。
如有任何产品相关问题，请联系我们的技术支持团队获取帮助。
储存条件
储存温度
- MitoBright LT Deep Red 储备液: -20°C，避光保存
- 工作液: 现配现用，避光
- 染色缓冲液: 4°C
- 固定样品: 4°C，避光保存
有效期
- 未开封试剂在 -20°C 避光条件下可保存 18 个月
- 储备液开封后，建议在 6 个月内使用完毕
- 工作液需现配现用，配制后 4 小时内使用
- 染色后的样品可在 4°C 避光条件下保存 2 周
- 固定样品可在 4°C 避光条件下保存 1 个月
注意事项
- 储备液建议分装后保存，避免反复冻融
- 染料对光敏感，全程需要避光操作
- 配制工作液时使用无菌、无荧光容器
- 使用前检查有无沉淀，如有需室温复溶
- 染色缓冲液需提前预热至 37°C
- 禁止使用过期试剂
运输信息
运输条件
产品采用专业冷链物流运输，全程温控 -20°C 以下。干冰包装确保运输过程中的低温环境，配备温度监控记录仪。
- 国内订单：1-3 个工作日送达
- 国际订单：3-7 个工作日送达
- 所有订单提供全程温度监控记录
收货注意事项
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收货时检查外包装是否完好，温度监控记录是否正常
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签收后立即将产品转移至 -20°C 冰箱保存
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如发现异常，请保留包装，24小时内与客服联系