产品概述
MitoPeDPP 是一种新型荧光染料，由于其具有三苯基膦结构，因此可以穿过细胞膜并在线粒体中聚集。聚集在线粒体内膜上的 MitoPeDPP 可以被脂质过氧化物氧化而释放出强荧光。
由于氧化的 MitoPeDPP (Ox-MitoPeDPP) 的激发和发射波长分别是 452 nm 和 470 nm，可以减小样品的光损伤和自发荧光，因此利用荧光显微镜 MitoPeDPP 可以检测活细胞中的脂质过氧化物。
该试剂盒适用于各种细胞类型，包括悬浮细胞和贴壁细胞，可用于流式细胞术、荧光显微镜和高内涵筛选等多种检测平台。无论是基础研究还是药物筛选，MitoPeDPP 都能提供准确、可靠的线粒体脂质过氧化物检测结果。
产品信息
- 产品名称: MitoPeDPP
- 产品编号: MT466
- 规格: 5μg*3
- 激发/发射波长: 488 nm / 535 nm
- 检测方法: 荧光显微镜/流式细胞仪
- 应用范围: 活细胞检测
产品特点
解决传统试剂的三个问题
观察线粒体膜电位时，传统上使用 JC-1、TMRE、TMRM 等试剂，但这些试剂存在 PFA 不可固定、荧光易淬灭、数据重现性差等问题。MT-1 MitoMP Detection Kit 克服了这些问题，成为线粒体膜电位检测的理想选择。此外，通过本试剂盒中包含的 Imaging Buffer，可以在抑制荧光背景和减少细胞损伤的状态下进行观察。
特异性聚集
试剂能够特异性地在细胞中的线粒体内聚集，确保检测结果的准确性和可靠性。通过精确定位于线粒体，可以有效避免其他细胞器的干扰，提供更加精准的检测数据。
脂质过氧化物检测
能够有效检测线粒体膜内的脂质过氧化物，为研究线粒体功能和氧化应激提供重要指标。这一特性使其成为研究细胞应激反应和线粒体功能障碍的理想工具。
双波长检测
可在 488 nm 和 535 nm 两个荧光波长下进行检测，提供更灵活的实验方案。双波长检测能力使其适用于多种检测平台和实验需求，增强了实验数据的可靠性。
应用案例
MitoPeDPP 与 MitoBright 共染色实验
实验条件
- • 细胞类型：HeLa 细胞
- • 处理条件：t-BHP（氢过氧化叔丁基）
- • MitoPeDPP 检测波长：Ex 470/40 nm，Em 525/50 nm
- • MitoBright DeepRed 检测波长：Ex 600/50 nm，Em 685/50 nm
实验结果表明，在 HeLa 细胞的线粒体中，MitoPeDPP 被 t-BHP 氧化后产生荧光信号。通过与线粒体特异性染料 MitoBright Deep Red (MT08) 的共染色实验，进一步证实了 MitoPeDPP 的荧光信号确实定位于线粒体中。
实验亮点
-
证实 MitoPeDPP 可被氧化物激活产生荧光
-
验证荧光信号特异性定位于线粒体
-
展示与其他线粒体染料的良好兼容性
Rotenone 诱导的脂质过氧化物检测
0 分钟
90 分钟
180 分钟
实验设计
实验条件
- • 细胞：HeLa 细胞
- • 培养容器：μ-slide，8 孔（Ibidi）
- • 处理试剂：Rotenone
- • 检测方法：荧光显微镜观察
实验结果
实验结果显示，随着 Rotenone 处理时间的延长（0、90、180 分钟），细胞中脂质过氧化物的产生逐渐增加，证实了 MitoPeDPP 可以有效检测 Rotenone 诱导的线粒体脂质过氧化。
技术参数
基本参数
| 规格 | 5μg*3 |
| 激发波长 | 488 nm |
| 发射波长 | 535 nm |
| 分子量 | 652.7 g/mol |
| 纯度 | >98% (HPLC) |
性能指标
| 检测灵敏度 | 0.1 μM |
| 线性范围 | 0.1-100 μM |
| 响应时间 | <5 min |
| 光稳定性 | t₁/₂ > 60 min |
| pH 稳定性 | pH 6.0-8.0 |
应用特性
细胞渗透性
特异性
兼容性
适用范围
细胞类型
-
贴壁细胞（HeLa、HEK293等）
-
悬浮细胞（Jurkat、K562等）
-
原代细胞
检测平台
-
荧光显微镜
-
流式细胞仪
-
高内涵分析系统
注意事项
实验注意事项
试剂使用
-
MitoPeDPP 储备液配制后应分装保存，避免反复冻融
-
工作液应现配现用，不建议长期储存
-
染料对光敏感，储备液和工作液应避光保存
实验条件
-
染色过程中保持细胞在 37°C 和适宜的 pH 条件下
-
避免细胞应激，可能导致假阳性结果
-
建议设置适当的阳性和阴性对照
检测要点
-
最佳工作浓度可能因细胞类型而异，建议进行浓度优化
-
流式检测时使用单细胞悬液，避免细胞聚集
-
荧光显微镜观察时注意选择合适的激发和发射波长
安全注意事项
个人防护
-
操作时必须穿戴实验服、防护手套和护目镜
-
在通风橱中进行操作，避免吸入试剂蒸气
应急处理
-
皮肤接触：立即用大量清水冲洗，必要时就医
-
眼睛接触：立即提起眼睑用流动清水冲洗15分钟以上
-
误食：立即漱口，就医治疗
废弃物处理
-
所有废弃物应按照当地法规进行分类处理
-
含有试剂的容器需进行特殊处理，不可直接丢弃
重要提示
- • 本产品仅用于研究用途
- • 不适用于诊断程序、治疗或人体使用
- • 请严格按照说明书操作，确保实验安全
- • 使用前请仔细阅读产品安全数据表(SDS)
相关文献
Shioji K, et al. (2010) "Synthesis and properties of fluorescence probe for detection of peroxides in mitochondria." Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 20(13): 3911.
Oka S, et al. (2016) "Human mitochondrial transcriptional factor A breaks the mitochondria-mediated vicious cycle in Alzheimer's disease." Scientific Reports, DOI: 10.1038/srep37889.
Nakamura S, et al. (2019) "Mitochondrial dysfunction in neurodegenerative diseases: recent insights and therapeutic opportunities." Nature Reviews Neuroscience, 20(7): 427-443.
储存条件
储存温度
- MitoPeDPP 储备液: -20°C，避光保存
- DMSO 溶剂: 室温
- 阳性对照试剂: -20°C
- 缓冲液组分: 4°C
有效期
- 未开封试剂盒在推荐储存条件下有效期为 18 个月
- 储备液配制后建议在 6 个月内使用完毕
- 工作液需要现配现用，不可储存
- 染色后的样品建议在 24 小时内完成检测
注意事项
- 储备液配制后需要分装，避免反复冻融
- 所有试剂均需避光保存和操作
- 溶液配制时使用无菌、无酶容器
- 使用前检查试剂外观，如有浑浊或沉淀请勿使用
- 严格遵守有效期，不使用过期试剂
储存要求详情
温度控制
长期储存
所有组分在-20°C条件下可长期保存
工作温度
实验过程中保持在室温或4°C
避免温度波动
防止反复冻融导致活性下降
光照防护
避光储存
使用棕色瓶或铝箔纸包裹
操作防护
实验过程中尽量避免强光照射
样品保护
染色后的样品需要避光保存
运输与收货
运输条件
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采用干冰运输，确保低温环境
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国内订单 2-3 个工作日送达
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全程温度监控，确保运输安全
收货注意事项
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签收时检查外包装完整性
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立即按储存温度要求分类保存
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核对清单确认产品完整性